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  • 液相色譜圖問題分析及解決辦法

    發(fā)布于 2011/03/04閱讀(3446)來源 zxj

    摘要

    液相色譜圖問題分析及解決辦法

    內(nèi)容

    A、峰拖尾
    1、篩板阻塞:a、反沖色譜柱b、更換篩板c、更換色譜柱
    2、色譜柱塌陷:填充色譜柱
    3、干擾峰:a、使用更長(zhǎng)的色譜柱b、改變流動(dòng)相或更換色譜柱
    4、流動(dòng)相pH選擇錯(cuò)誤:調(diào)整pH值。對(duì)于堿性化合物,低pH值更有利于得到對(duì)稱峰
    5、樣品與填料表面的活性點(diǎn)發(fā)生反應(yīng):a、加入離子對(duì)試劑或堿性揮發(fā)性修飾b、更改色譜柱

    B、峰前延
    1、柱溫低:升高柱溫
    2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng):使用流動(dòng)相作為樣品溶劑
    3、樣品過載:3、降低樣品含量
    4、色譜柱損壞:見A1、A2

    C、峰分叉
    1、保護(hù)柱或分析柱污染:取下保護(hù)柱再分析。也可更換保護(hù)柱。拆下來清洗。如果問題仍然存在,可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染,可運(yùn)用適當(dāng)?shù)脑偕胧H暨€不行,可能是入口處堵,可以更換篩板或色譜柱。
    2、樣品溶劑不溶于流動(dòng)相:改變樣品溶劑,如果可能,采取流動(dòng)相作為樣品溶劑

    D、含量高的成分峰
    1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng):減少樣品載量

    E、早出的峰變形
    樣品溶劑選擇不恰當(dāng):a、減少進(jìn)樣體積b、運(yùn)用低極性樣品溶劑

    F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
    柱外效應(yīng):a、調(diào)整系統(tǒng)連接(使用更短、內(nèi)徑更小的管路)b、使用小體積的流通池

    G、K′增加時(shí),脫尾更嚴(yán)重
    1、二級(jí)保留效應(yīng),反相模式:a、加入三乙胺 b、加入乙酸c、加入鹽或緩沖劑d、更換一支柱子
    2、二級(jí)保留效應(yīng),正相模:a、加入三乙胺 b、加入乙酸
    c、加入水 d、試用另一種方法
    3、二級(jí)保留效應(yīng),離子對(duì):加入三乙胺

    H、酸性或堿性化合物的峰拖尾
    緩沖液濃度不合適:a、使用濃度50-100mmol/L的緩沖液b、使用Pka等于流動(dòng)相PH值的緩沖液

    I、額外的峰
    1、樣品中有其他組分:正常
    2、前一次進(jìn)樣的洗脫峰:a、增加運(yùn)行時(shí)間或梯度b、使用pH等于流動(dòng)相pH的緩沖液
    3、空位或鬼峰: a、檢查流動(dòng)相否純凈b、使用流動(dòng)相作為樣品溶劑c、減少進(jìn)樣體積

    J、保留時(shí)間波動(dòng)
    1、溫控不當(dāng):重新設(shè)定柱溫
    2、流動(dòng)相組分變化:防止變化(蒸發(fā)、反應(yīng)等)
    3、色譜柱沒有平衡:在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱

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