分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。

      分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。
     常用的波長范圍為：（1）200～400nm 的紫外光區(qū)，（2）400～760nm 的可見光區(qū)，（3）2.5～25μm（按波數(shù)計(jì)為4000～400cm-1）的中紅外光區(qū)和（4）780～2500nm 的近紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度，所用儀器應(yīng)按照國家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進(jìn)行校正檢定。
      單色光輻射穿過被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí)，在一定的濃度范圍內(nèi)被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式：
     A＝lg1/T＝ECL
式中A 為吸光度；
     T 為透光率；
     E 為吸收系數(shù)，采用的表示方法是E1%1cm，其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1％（g/ml），液層厚度為1cm 時(shí)的吸光度數(shù)值；
     C 為100ml 溶液中所含被測(cè)物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計(jì)算），g；
     L 為液層厚度，cm。
     物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后，可用同樣條件將該供試品配成溶液，測(cè)定其吸光度，即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收，但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測(cè)定，故又稱比色分析。