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      9. PCR 儀480使用標準操作規程

        發布于 2011/12/20閱讀(1807)來源 zxj標簽 PCR 儀

        摘要

        原理:聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法,在微生物感染的診斷中具有重要的價值。

        內容

        原理:聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法,在微生物感染的診斷中具有重要的價值。在PCR擴增過程中,擴增的DNA產量是呈指數上升的,經過n個循環的擴增,一個DNA分子的產量便達到2n個拷貝。PCR產物一般為1013拷貝/ml,取0.1ml

        主體內容(操作步驟,必填項目):
        開啟PCR儀電源至ON 位置;屏幕顯示版本信息后,出現step to edit file# 3.
        SOAK file# 1的編輯:
        file# 1是在某一溫度下持續無限長時間,即只可修改溫度。按 file →1→Enter鍵;顯示SOAK temperature (0-100) 25℃;可根據實驗需要修改溫度,如要30℃,按3,0,再按Enter鍵,顯示End of file,RUN-STORE-PRINT, 按NO,使光標至store 的下方,按Enter 或yes鍵顯示:File store Enter user# 選擇自己的數碼代號,按數字鍵盤后,按Enter鍵,顯示: file store Enter file#選擇空白程序號,按數字鍵盤,按Enter鍵,顯示 Yes to store User # ××× file # ××× 按yes鍵,此號即為用戶存儲程序。
        Time delay File # 2 的編輯:
        Time delay file #是在某一溫度下保溫有限時間,按 file →2→Enter鍵,顯示:Time delay File Step to edit file # 2 按step 鍵,顯示 delay time (0-999) 7 min 0 sec 按要求修改后按enter鍵,調好min, sec后,顯示beep while delay? NO- YES, 按NO→Enter,顯示 link to a stored file, 若無需連接,按0→Enter, 按NO,讓光標停留在store 下方,按Enter, 按自己的數碼代號,按Enter, 按程序代號,按 yes (yes to store)。
        File # 3 的編輯:
        File # 3是溫度循環,溫度上升和下降比File # 4慢,編此程序大致同File # 4。
        File # 4的編輯:
        File # 4是程序循環,溫度上升和下降快。按File → 4→Enter,顯示 step- cycle file Step to edit File # 4, 按step, 顯示:seg1 target temperature 94℃,如需修改則按數字鍵后,按enter, 否則直接按enter, 顯示:seg1 segment time (0-999)1 min 0 sec 修改好min, sec 后,按enter,顯示:seg2 target temperature 37℃ 溫度時間修改方法同上,完成后按enter, 顯示:seg3 target temp 72℃, 溫度時間修改同上,seg 4 全部按0, 按 enter,顯示:auto seg extension NO- YES, 按NO,顯示:auto seg extension,NO- YES,
        按enter(step/yes) 回答 yes, 顯示: extension per cycle (0-59)1 如果每個循環是延長1 sec, 按enter, 否則修改后按enter 鍵,顯示:cycle count (1-99)25,修改后, 按 enter 鍵,顯示 link to store file (0-99, 0= shut off) 0,若不與其它程序連接則按0,enter. 若與其它程序連接則按程序號,按enter, end of file RUN –STORE-PRINT 按NO,光標至 STORE 下方,按ENTER,顯示: file store enter file # 按程序代碼,按enter, 顯示 yes to store User # ××× file # ×××按YES.

        清除程序
        按 file →所要清除的程序號→enter, 按file →clear, 顯示 file # ×× deleted, enter new file #, 這樣你所需要清除的程序被清楚,這一空白程序則可編入新程序。

         

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